全套線粒體研究工具,幫你“一網打盡”!

發布者:艾美捷科技發布時間:2020-08-19

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       線粒體是存在于所有真核細胞中的獨特的膜結合細胞器,作為ATP生產和細胞能量供應的主要場所,線粒體的獨特方面(包括稱為mDNA的單獨遺傳物質,其自身的蛋白質合成機制以及嚴格調節的膜電位梯度)使其成為重要的研究課題,另外,隨著衰老過程和更多其他人類疾病方面的研究發現,線粒體的作用比以往更加值得我們研究。

 

       這期主要給大家帶來線粒體熒光探針(活細胞和固定細胞),線粒體膜電位探針,ATP檢測,線粒體自噬檢測,線粒體通透性轉換孔(MPTP)檢測相關工具。

 

       一.細胞線粒體染料

 

       1. 用于標記活細胞線粒體的可用MitoLite™染料

 

產品名稱 樣品類型 可固定 Ex
(nm)
Em
(nm)
濾光
片組
規格 貨號 對應試劑盒
MitoLite™藍色FX490 活細胞 344 469 DAPI 500 tests 22674 22665
MitoLite™綠色FM 活細胞 不行 508 528 FITC 10x50ug 22695 --
MitoLite™綠色EX488 活細胞 不行 508 528 FITC 500 tests 22675 22666
MitoLite™橙色EX405 活細胞 不行 425 522 FITC 500 tests 22679 22673
MitoLite™橙色FX570 活細胞 553 576 TRITC 500 tests 22676 22667
MitoLite™Red FX600 活細胞 580 598 TRITC 500 tests 22677 --
MitoLite™紅色CMXRos 活細胞 579 599 TRITC 10x50ug 22698 22668
MitoLite™深紅色FX660 活細胞 640 659 Cy5 500 tests 22678 22669
MitoLite™NIR FX690 活細胞 658 691 Cy5 500 tests 22690 22670

 

       2. CytoFix™紅色固定線粒體染色

 

      CytoFix™Red線粒體染色劑增強的細胞維持能力可使線粒體局部熒光得到保持,即使固定過程中線粒體膜電位喪失后也可以保留。該染料產生的熒光信號在溶酶體中得到很好的保留,使其便于長期跟蹤線粒體。CytoFix™紅色線粒體染色劑可與GFP表達的細胞,其他熒光偶聯物和其他細胞器染色劑一起使用,進行多色分析。它既可用于懸浮細胞,也可用于貼壁細胞,并易于適應各種熒光平臺。

 

       CytoFix™紅色線粒體染色的特征:

 

      線粒體染色效率高

      固定后可長期保留

      操作時間短,標記步驟簡便

HeLa細胞熒光圖像

      圖2.在96孔黑邊框透明底板上用CytoFix™MitoRed染色的HeLa細胞的熒光圖像。

 

       CytoFix™Red適用于固定細胞線粒體染色

 

產品名稱 樣品類型 可固定 Ex(nm) Em(nm) 濾光片 規格 貨號
CytoFix™紅色線粒體染色 活細胞 540 590 Cy3 / TRITC 500 tests 23200

 

       二.線粒體膜電位:

 

      電子傳輸鏈產生的線粒體膜電位(ΔΨm)是健康的線粒體功能所必需的關鍵參數。與質子梯度一起,它產生了線粒體ATP合成背后的驅動力。它通過選擇性消除功能異常的線粒體在線粒體穩態中發揮關鍵作用,并且是線粒體鈣穩態的重要組成部分。

 

      凋亡早期的顯著特征是正常線粒體功能的破壞, 線粒體膜的破壞和氧化還原電位可能會引起細胞活力的不必要損失,并成為導致各種疾病的原因。我們提供各種各樣的熒光探針,用于分析活細胞中正常線粒體活性的各個方面,包括活性氧(ROS)產生,線粒體膜電位和鈣通量。

        1. JC-10™雙發射膜電位(ΔΨm)探針

 

       JC-10™是JC-1的衍生物,是電位依賴性探針,用于通過流式細胞儀,熒光顯微鏡和基于微孔板的熒光測定法確定ΔΨm。在健康細胞中,JC-10™選擇性地聚集在線粒體中,生成橙色的JC聚集體,該聚集體在590 nm處顯示出較寬的激發光譜和最大發射。然而,在具有低ΔΨm的凋亡和壞死細胞中,JC-10™從線粒體中擴散出來,并生成JC-10™單體,導致向綠色發射(525 nm)處轉移。JC-10™允許以定性和定量方式來可視化ΔΨm的變化,分別考慮從橙色到綠色的熒光發射和熒光強度比的變化。它已成功用作多種樣本類型的ΔΨm指示劑,包括肌細胞,神經元等。

 

       JC-10™的特點:

 

      易于使用:稀釋到水性緩沖液中時,JC-10™不會沉淀,從而消除了偽影。

      堅固:JC-10™由于在水性介質中的溶解度提高和靈敏度更高,因此測定偏差較小。

      增強的信號:JC-10™具有比JC-1高的信噪比。

      增強的靈敏度:在所有測試的細胞系中,JC-10™能夠比JC-1更好地檢測到ΔΨm損失的細微變化。

      廣泛的應用:JC-10™可用于原代大鼠肝細胞檢測

      方便:JC-10™與熒光酶標儀,細胞成像儀和流式細胞儀兼容。

 

JC-10™

      圖3.用JC-10™(貨號22204)和JC-1(貨號22200)在Jurkat細胞中測定了喜樹堿誘導的線粒體膜電位變化。將Jurkat細胞用喜樹堿(10 µM)處理4小時后,將JC-1和JC-10™染料加載溶液添加到孔中,并孵育30分鐘。使用NOVOstar酶標儀(BMG Labtech)在Ex / Em = 490/525 nm和540/590 nm下測量了JC-1和JC-10™的J聚集體和單體形式的熒光強度。

 

       JC-10™和JC-1雙發射線粒體膜電位探針

 

探針名稱 Ex/Em Ex/Em 濾光片組 規格 貨號
JC-10™*替代JC-1 * 508/524
(單體)
508/570
(聚合體)
FITC(單體)
TRITC(聚合體)
5x100ul 22204
JC-1 515/530
(單體)
515/590
(聚合體)
FITC(單體)
TRITC(聚合體)
5mg 22200
JC-1 515/530
(單體)
515/590
(聚合體)
FITC(單體)
TRITC(聚合體)
50mg 22201

 

        2. 線粒體選擇性羅丹明酯

 

      細胞滲透性陽離子羅丹明,例如TMRE和TMRM,很容易被活性線粒體隔離,通常用于標記活細胞中的線粒體。像JC-10™一樣,線粒體中TMRE和TMRM的吸收是由線粒體膜電位驅動的。兩種染料都已成功用于動態和原位定量檢測,用于篩選線粒體通透性轉換孔的抑制劑,評估活細胞中線粒體的功能,并可用于區分活的和死的細胞群,這些電位染料表現出最小的自發淬滅性,低細胞毒性和合理的光穩定性,它們的熒光強度可以用流式細胞儀或熒光顯微鏡進行測量。與TMRM相比,TMRE的疏水性略強。

 

       用于測量線粒體膜電位的電位染料

 

探測名稱 Ex(nm) Em(nm) 濾光片組 規格 貨號
TMRE [四甲基羅丹明乙酯] * CAS#:115532-52-0 * 552 574 TRITC 25mg 22220
TMRM [四甲基羅丹明甲酯] * CAS#:115532-50-8 * 552 574 TRITC 25mg 22221

 

       三.ATP測定

 

      三磷酸腺苷(ATP)是一種復雜的有機分子,參與細胞的能量生成,代謝調節和細胞信號傳導。它作為主要能源存在于所有活生物體中,并在沒有活生物體的情況下迅速降解。因此,ATP測定是一種有用的工具,可用于各種研究應用程序中,以鑒定活生物體的存在。常見的應用包括細胞活力和細胞毒性,表面細菌的檢測,水中細菌的定量,培養中的體細胞以及食品質量和污染測試。

 

       我們的PhosphoWorks™發光ATP分析提供了一種快速,簡單且均一的生物發光方法,可用于通過ATP檢測確定哺乳動物細胞的細胞活力,細胞毒性和增殖。

 

       用于測量ATP活性,以及生成或消耗

 

產品名稱 Ex / Abs(nm) Em(nm) 微孔板類型 規格 貨號
PhosphoWorks™熒光ATP檢測試劑盒 540 590 黑色 100 tests 21620
PhosphoWorks™比色ATP檢測試劑盒 570 -- 透明底 100 tests 21617
PhosphoWorks™發光ATP分析試劑盒*亮光* -- -- 白色 1板 21610
PhosphoWorks™發光ATP分析試劑盒*亮光* -- -- 白色 10板 21621

 

        四.線粒體自噬:

 

      線粒體自噬主要是由去極化線粒體的積累引起的。線粒體作為消除系統,消除了由氧化應激和DNA損傷引起的功能異常的線粒體,導致螯合成自噬體,然后與溶酶體融合并發生降解。

 

產品名稱 貨號 Ex/Em(nm)
Cell Meter 線粒體自噬熒光成像試劑盒 22998 510/580

 

       五.線粒體通透性轉換孔(MPTP):

 

      線粒體通透性轉換孔(MPT孔或MPTP)是由線粒體內膜和內層膜的組分形成的非特異性通道,可能參與細胞凋亡過程中線粒體組分的釋放。在健康細胞中,MPTP在打開和關閉狀態之間轉換,但在細胞死亡期間,MPTP會極大地改變線粒體的通透性。細胞色素c的釋放和線粒體膜電位的丟失發生在連續的孔活化之后。

 

產品名稱 貨號 規格
線粒體通透性轉化孔(mPTP)檢測試劑盒 K239 100 tests

 

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      艾美捷科技與國內外優秀的生物試劑供應商優保持著密切的合作關系,目前已成為眾多國際知名品牌的中國總代理或一級代理,主要包括:AmyJet、AAT Bioquest、Abnova、Agrisera、Biovision、Biosensis、Cayman Chemical、Caisson Labs、Cytoskeleton、CytoNiChe、Epigentek、Equitech-Bio、Hycult Biotech、Jackson、LifeSensors、LigaTrap、ProSpec、Norgen Biotek、Mabtech、Matreya、iRegene、StressMarq、ImmunoReagents、SouthernBiotech、Origene、US Biological、Solis BioDyne等,可以在短時間內為用戶提供專業的前沿資訊、完備的產品及物流服務。

 

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